Efecto del porcentaje de glicerol en la criopreservación de semen en aves de combate.
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2021
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Universidad Católica de Cuenca.
Resumen
Optimization of rooster sperm cryopreservation is aimed at the efficient use of cryoprotective agents (CPA) to increase cryosurvival. Glycerol (Gly) is the most efficient CPA used in avian species, however, its concentration can influence post-thaw sperm motility and viability. The present study evaluated the effect of different concentrations of Gly added (v/v) Lake-Ravie extender on the sperm cryosurvival of the fighting rooster. For this purpose, six Spanish fighting cocks were used to obtain a total of 36 ejaculates obtained by dorsal massage (6 sessions/week). Six semen groups (pools) of 6 ejaculates each were formed. Each pool pre-diluted (1: 1) with Lake-Ravie was divided into 6 aliquots that were finally diluted with 0 (control), 2 (Gly-2), 4 (Gly-4), 6 (Gly-6), 8 (Gly-8), and 10% (Gly-10) glycerol respectively, and frozen in static liquid nitrogen vapors. The kinetics and plasma membrane integrity (PMI) were evaluated before and after freezing of each treatment using the computerized CASA system (SCA) and the simple fluorescence test (propidium iodide), respectively. The results showed that only total (TM) and progressive (PM) motility were affected (P<0.001) by the cryopreservation process. The Gly-8 group yielded higher MT (P<0.01) than control, Gly-2, Gly-4 and Gly-6 groups; and a higher MP (P<0.05) than the control group. The straightness (STR) was higher (P<0.05) after freezing with Gly-2 and Gly-6 compared to the control, while the oscillation (WOB) was higher (P <0.05) with Gly -6 and Gly-8 compared to control. Likewise, higher values (P <0.05) of beat-cross frequency (BCF) were obtained with the Gly-6, Gly-8 and Gly-10 groups than control group. Finally, PMI value (viability) was higher with Gly-8 compared to Gly-2 (P <0.05) and control (P <0.01), irrespective of plasma membrane functionality (HOST+). In conclusion, the addition of 8% glycerol to the freezing medium yielded a better kinetic response and plasma membrane integrity of cryopreserved fighting rooster sperm.
Keywords:. Fighting rooster, semen, glycerol, freezing, Lake-Ravie
Descripción
Las optimizaciones de la criopreservación de espermatozoides de gallo van direccionados al uso eficiente de agentes crioprotectores (ACP) para incrementar la criosupervivencia. El glicerol (Gly), es el mejor ACP usado es especies aviares, sin embargo, su concentración puede influir en la motilidad y viabilidad espermática post-descongelación. El presente estudio evaluó el efecto de diferentes concentraciones de Gly adicionado (v/v) diluyente Lake-Ravie sobre la criosupervivencia espermática del gallo de combate. Para este propósito, seis gallos de combate españoles fueron utilizados para obtener un total de 42 eyaculados obtenidos por masaje dorsal (7 sesiones/ semana). Se conformaron 7 agrupaciones de semen (pools) de 6 eyaculados cada uno. Cada pool pre-diluido (1:1) con Lake-Ravie fue dividido en 6 alícuotas que fueron diluidas finalmente con 0 (control), 2 (Gly-2), 4 (Gly-4), 6 (Gly-6), 8 (Gly-8), y 10% (Gly-10) de glicerol respectivamente, y congeladas en vapores de nitrógeno líquido estático. La cinética e integridad de la membrana plasmática (IMP) fueron evaluadas antes y después de la congelación de cada tratamiento usando el sistema computarizado CASA (SCA ) y la prueba de fluorescencia simple (yoduro de propidio), respectivamente. Los resultados demostraron que solo las motilidades totales (MT) y progresiva (MP) fueron afectados (P < 0,001) por el proceso de criopreservación. El grupo Gly-8 produjo valores más altos de MT (P<0,01) en comparación con el control, Gly-2, Gly-4 y Gly-6; y una MP mayor (P<0,05) comparada con el control. El índice de rectitud (STR) fue superior (P<0,05) después de congelar con Gly-2 y Gly-6 comparados con el control, mientras que la oscilación (WOB) fue superior (P<0,05) con Gly-6 y Gly-8 comparadas con el control. Así mismo, valores más altos de batida de flagelo (BCF) fueron obtenidos (P<0,05) con los grupos Gly-6, Gly-8 y Gly-10 en comparación con su control. Finalmente, la IMP (viabilidad) fue superior con Gly-8 comparada con Gly-2 (P<0,05) y control (P<0,01), independientemente de la funcionalidad de la membrana plasmática (HOST+). En conclusión, la adición de glicerol al 8% al medio de congelación produce una mejor respuesta cinética e integridad de la membrana plasmática de espermatozoides de gallo de combate criopreservados.
Palabras claves:. Gallos de pelea, semen, glicerol, congelación, Lake-Ravie.
Palabras clave
GALLOS DE PELEA, SEMEN, GLICEROL, CONGELACIÓN, LAKE-RAVIE
Citación
Reinoso León, A (2021). Efecto del porcentaje de glicerol en la criopreservación de semen en aves de combate. [Trabajo de titulación]. Universidad Católica de Cuenca.
