Moscoso Piedra, Andrés LeonardoRivadeneira Romero, Marlon SebastiánRequena Lozano, José Luis2026-11-052026-11-052026APA4BT2026-VT38https://dspace.ucacue.edu.ec/handle/ucacue/23310La criopreservación de semen constituye una biotecnología para la conservación de recursos genéticos ovinos, donde las fases críticas de congelación y descongelación inducen un severo estrés oxidativo (EO) y la acumulación de especies reactivas de oxígeno (ROS), desencadenando alteraciones irreversibles en la arquitectura lipídica de la membrana plasmática espermática, debido a su alta proporción de ácidos grasos poliinsaturados (PUFA) y baja concentración endógena de colesterol propia de la especie. Para mitigar este daño, la adición de nanocomplejos de colesterol-metil-β-ciclodextrina (CLC) en los diluyentes comerciales representa una alternativa para preservar la viabilidad celular. Esta investigación determinó el efecto de CLC en sustitución de la yema de huevo dentro del diluyente Triladyl, evaluando su impacto sobre la calidad espermática post-descongelación. Se recolectaron cinco eyaculados de un carnero de la raza Katahdin, ajustándose a una concentración de 50×10⁶ espermatozoides por dosis. Las muestras se dividieron en cuatro grupos: uno de control y tres tratamientos suplementados con 1 mg, 2 mg y 3 mg de CLC. Tras la criopreservación, el semen fue evaluado mediante el sistema CASA, tinción de Eosina-Nigrosina, el test HOST y la fluoresencia MitoTracker Green. Los resultados evidenciaron que la suplementación con 1 mg de CLC brindó una protección superior a la membrana espermática, además de proteger la actividad mitocondrial, mejorando así su integridad funcional, mientras la progresividad sufrió alteraciones, se mantuvo estable respecto al control. Se concluye que el uso de nanocomplejos de CLC optimiza la criopreservación seminal ovina, ofreciendo una alternativa biosegura frente al uso de yemas de huevo. Palabras clave: colesterol-metil-B-ciclodextrina (CLC), criopreservación, semen ovino, estrés oxidativo, calidad espermática.Cryopreservation of sheep semen constitutes an essential livestock biotechnology for the conservation and dissemination of genetic resources of high zootechnical value within sustainable production systems. However, the critical phases of thermal descent, freezing, and thawing induce severe oxidative stress (EO) and the accumulation of reactive oxygen species (ROS), triggering irreversible alterations in the lipid architecture of the sperm plasma membrane due to its high proportion of polyunsaturated fatty acids (PUFAs) and low endogenous cholesterol concentration. To mitigate this cryogenic damage, the addition of methyl-β-cyclodextrin-cholesterol nanocomplexes (CLC) in commercial diluents represents a superior biotechnological alternative to stabilize the membrane and preserve cell viability. The purpose of this research was to determine the optimal concentration of (CLC) as a substitute for egg yolk within the Triladyl diluent, evaluating its impact on post-thaw sperm quality. Five ejaculates from a Katahdin ram were collected using an artificial vagina, adjusted to a concentration of 50 × 10⁶ sperm per dose. The samples were divided into four groups: one control and three treatments supplemented with 1 mg, 2 mg, and 3 mg of (CLC). After cryopreservation in liquid nitrogen, the semen was evaluated using the computerized CASA system, Eosin-Nigrosin staining, the HOST test, and the fluorescent probe MitoTracker Green. The results showed that supplementation with 1 mg of (CLC) provided superior protection to the sperm membrane against osmotic and thermal variations, significantly improving its functional integrity and flagellar beat frequency, while the parameters of overall viability and mitochondrial activity remained stable compared to the control. It is concluded that the use of (CLC) nanocomplexes optimizes ovine semen cryopreservation, offering a biosecure alternative to the use of avian-origin yolks. Keywords: methyl-B-cyclodextrin-cholesterol (CLC), cryopreservation, ovine semen, oxidative stress, sperm quality.application/pdf13 páginasspainfo:eu-repo/semantics/openAccessAtribución 4.0 Internacionalhttp://creativecommons.org/licenses/by/4.0/deed.esCOLESTEROL-METIL-B-CICLODEXTRINACRIOPRESERVACIÓNSEMEN OVINOESTRÉS OXIDATIVOCALIDAD ESPERMÁTICA.info:eu-repo/semantics/articlehttps://doi.org/10.56519/3bp0e247Revista Científica Multidisciplinaria InvestiGo